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产品名称:DAPI
产品简介:DAPI,也称DAPI dihydrochloride,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。用于细胞染色体和DNA的染色.
 

产品简介
        DAPI,也称DAPI dihydrochloride,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。因为DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂,它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。尽管DAPI不能通过活细胞膜,但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用来检测酵母线粒体DNA,叶绿体DNA,病毒DNA,microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。
 

中文名称:  4",6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐
英文名称:  4",6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride
分子式: C16H17Cl2N5
分子量: 350.25
CAS: 28718-90-3
纯度: >90%
DAPI最大激发波长: 340nm
DAPI最大发射波长: 488nm
DAPI-DNA最大激发波长: 364nm
DAPI-DNA最大发射波长: 454nm
 

运输与保存方法
        常温运输。粉末在室温下稳定,需避光储存。
注意事项
        1)DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
        2)荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
        3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
        4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
配制母液
        用双蒸水溶解,终浓度为1-5mg/ml。本产品不可以用缓冲液直接溶解。-20℃可保存1年,建议分装保存,避免反复冻融。
使用方法
1.配制工作液:用双蒸水或PBS稀释母液,配制成所需要的工作的浓度(0.5-10μg/ml)。
2.固定的细胞或组织染色:
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色,则直接进行DAPI 染色。
        a)对于贴壁细胞或组织切片:加入适量DAPI染色液,覆盖住样品即可。
对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
        b)吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
        c)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm,发射波长460nm。
3. 活细胞或组织染色:
        a)细胞培养物中加入适量DAPI染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
        b)在 37℃培养细胞 10~20 分钟。
        c)用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
        d)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm,发射波长460nm。