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产品名称:热启动重组Taq DNA聚合酶
产品简介:热启动重组Taq DNA聚合酶,更高的特异性.
 

        热启动Taq DNA聚合酶是重组Taq DNA聚合酶和其特异性抗体的混合物,抗体能够在室温抑制聚合酶活性,由于抗体的结合,Taq DNA聚合酶以失活的状态存在,这可以防止PCR起始阶段在较低温度发生非特异性引物的退火延伸和引物二聚体的形成。Taq DNA聚合酶通过依赖温度的方式(95ºC)获得活性,在高温时一旦抗体与酶解离,Taq DNA聚合酶重新具有活性,这使得热启动Taq DNA聚合酶非常适合实时定量PCR。

           Taq DNA聚合酶(5U/μl)   Cat No. RE-12-002 1,000 U               250 U

           10X RT Buffer                                                 1000 μl             1000 μl

典型PCR条件

        本产品热启动Taq DNA聚合酶可耐受高达98℃的高温,因此变性温度可采用96℃的高温,时间也可以缩短到10s。本产品的PCR产物保真度高于传统的Taq DNA聚合酶。

典型PCR程序:

       在0.2ml薄壁PCR管中加入:

         Taq DNA 聚合酶                          1ul

          10×PCR 缓冲液                         5ul

         引物1                                           2ul

          引物2                                          2ul

          模板                                    1~10ul

           补加水至                                  50ul

        轻轻离心后按以下程序进行PCR循环:

        预变性:95°C×15mins

        循环:94°C×10s, (Tm-5)°C×20s, 72°C (基因长度kb/2×60)s, 30~40个循环

       最后延伸:72°C×3mins

        PCR结束后,高速离心2 mins以上,然后进行合适浓度的琼脂糖凝胶电泳分析。

         保存于-20°C,缓冲液使用前室温化冻,使用后立即冻存。