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产品展示 > 分子诊断用酶脱氧核糖核酸酶
产品名称:脱氧核糖核酸酶
产品简介: 脱氧核糖核酸酶(Deoxyribonuclease I,DNase I)是一种采用基因工程技术表达和纯化获得的高纯度脱氧核糖核酸酶,可特异性的水解DNA,靶向水解相邻碱基的磷酸二酯键,产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸,平均消化产物最小为四个碱基的核苷酸片段。该酶由260个氨基酸组成,包含2对二硫键。酶活性依赖予二价金属离子Mg2+和Ca2+,只有在这两种金属离子参与的条件下才能水解DNA。本品对酸性条件较为敏感,在pH为3.0的环境下,完全失去酶切DNA的活性。分子生物学实验中常用本品清除蛋白中的 DNA,或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。也用于RNA制备中DNA的去除。
 
性  状
    本品为无色透明溶液。 
活性单位定义
        25℃,pH5.0 条件下DNase催化底物 DNA,使每毫升每分钟A260 增加0.001的变化定义为一个酶活力单位(Kunitz unit)。
使用方法
    (1)反应体系:蛋白提取液中按照 1/100 体积加入 DNase I 储存液(使其终浓度为 20 U/mL),1/100 体积加入 1 M MgCl2。 
    (2)反应条件:37℃,30-60 min。继续后续蛋白提取实验即可。 
    【注】:由于 EDTA 能螯合酶活性需要的 Ca2+和Mg2+,蛋白初始裂解液中要去除 EDTA,否则会降低DNase I的酶活性。
规  格
    1000 U/支(0.5ml)。
保存条件
     20 mM sodium acetate(pH 6.5),5 mM CaCl2,0.1 mM PMSF,50%甘油
有效期
    液体-20℃可稳定保存三年。