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产品名称:重组TEV蛋白酶(GST标签)
产品简介: 重组TEV蛋白酶,纯度95%,带GST标签,适合生物工程下游融合蛋白的酶切和纯化。
 

产品简介 
        重组TEV蛋白酶(GST标签)是烟草花叶病毒小核体蛋白a催化结构域基因编码的经高度纯化的制剂,该酶的生物学功能是在病毒产生过程中将多蛋白体酶解为单一蛋白。和因子Xa、凝血酶相比,TEV酶是识别序列更加严格。做为生物工程下游技术中融合蛋白酶切使用的重要工具酶,TEV酶识别非常一致的7氨基酸序列:E-Xaa-Xaa-Y -Xaa-Q-P1’(G/S),酶切发生在Q和P1’之间的肽键。最常用的7氨基酸序列是ENLYFQG。P1’位置可以是不同的小分子氨基酸,这样目标蛋白从融合蛋白的N端释放,带自然的N末端或者只多一个氨基酸的蛋白。该产品是经过了基因工程改造的蛋白酶,稳定性好,在广泛的温度范围具有特异性。本品来源于重组大肠杆菌,经过高度纯化,比活性达到10,000U/mg。最适酶切温度是30℃,但在4℃也具有酶活性。rTEV-H带His标签,酶切后可方便地通过谷胱甘肽亲和柱层析去除。酶切的条件比如:温度、pH、DTT等可根据具体蛋白进行优化。
纯 度
        经SDS-PAGE电泳分析,大于95%。
活性单位
        一个酶活性单位定义为在4℃,pH8.0条件下,12~16小时在酶切反应缓冲液中将5μg融合蛋白95%酶切所需要的酶量。
推荐酶切条件
                融合蛋白                                  0.1mg
                重组TEV蛋白酶                           20U
                10x酶切缓冲液                            10μl
                温度(℃)                                      4
                总体积                                       100μl
                时间(小时)                          12~16
10x 酶切缓冲液
                500 mM Tris-HCl, pH 8.0
                5 mM EDTA
                1% Tween-20 (v/v)
                10 mM DTT
保存条件
         -20℃保存活性保持2年以上。
参考文献
        Kapust RB, Tözsér J, Copeland TD, Waugh DS. The P1' specificity of tobacco etch virus protease, Biochem Biophys Res Commun. 2002 Jun 28;294(5):949-55.